紫花苜蓿幾丁質(zhì)酶基因MsChiⅣ克隆及序列分析

本研究根據(jù)截形苜蓿(Medicago truncatula)根部的幾丁質(zhì)酶基因保守序列(GenBank登錄號:AF167328)設(shè)計(jì)引物,通過RT-PCR直接擴(kuò)增的方法得到了紫花苜蓿(Medicago Sativa L.)根部幾丁質(zhì)酶基因保守序列.根據(jù)得到的保守序列設(shè)計(jì)3'端和5'端特異引物,分別從3'端和5'端擴(kuò)增延長該片段,最后通過序列拼接獲得紫花苜蓿根部一種幾丁質(zhì)酶基因的全長cDNA序列,命名為MsChiⅣ(GenBank登錄號:FJ487629).MsChiⅣ基因全長為1 025 bp,開放性閱讀框全長為849 bp,編碼282個氨基酸,分子量為30.5 kD,預(yù)測等電點(diǎn)為4.66,其結(jié)構(gòu)包括信號肽、幾丁質(zhì)結(jié)合區(qū)、糖苷水解酶區(qū),為Ⅳ類幾丁質(zhì)酶,屬于幾丁質(zhì)酶第19家族,在氨基酸水平上與截形苜蓿幾丁質(zhì)酶蛋白同源性最高,達(dá)到98%.蛋白結(jié)構(gòu)分析表明該基因編碼蛋白為非跨膜蛋白,存在于細(xì)胞質(zhì)中.

作 者： 王步云 李聰 王涌鑫 關(guān)寧 苗麗宏 Wang Buyun Li Cong Wang Yongxin Guan Ning Miao Lihong   作者單位： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所,牧草遺傳育種研究室,北京,100193  刊 名： 分子植物育種  英文刊名： MOLECULAR PLANT BREEDING  年，卷(期)： 2009 7(2)  分類號： S6  關(guān)鍵詞： 幾丁質(zhì)酶基因   紫花苜蓿   克隆   分析  

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