油菜葉片總蛋白質(zhì)雙向電泳樣品制備方法的改進(jìn)

以甘藍(lán)型油菜"揚油6號"的葉片為試驗材料,分別采用傳統(tǒng)的TCA/Acetone(三氯乙酸/丙酮沉淀法)和改進(jìn)的PEG(polyethylene glycol)分步提取法提取葉片可溶性總蛋白,并利用條件一致的蛋白質(zhì)雙向電泳體系進(jìn)行比較.TCA/Acetone法提取的蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜背景中由于高豐度"housekeeping"結(jié)構(gòu)蛋白的存在,特別是葉片中參與光合作用的Rubisco蛋白的干擾,圖譜中低豐度調(diào)控蛋白受到了高度覆蓋和遮蔽現(xiàn)象,影響雙向電泳圖譜的質(zhì)量.而PEG分步提取法提取的蛋白質(zhì)樣品,可以剔除Rubisco蛋白,使獲得的雙向電泳圖譜清晰,無斑點間的遮蔽現(xiàn)象,為油菜葉片蛋白質(zhì)組定量和定性分析提供了豐富的信息.

作 者： 孔芳 蔣金金 吳磊 葛才林 王幼平   作者單位： 揚州大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,揚州,225009  刊 名： 生物技術(shù)通報  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2010 ""(5)  分類號：   關(guān)鍵詞： 油菜   葉片總蛋白   雙向電泳   圖譜  

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