pcEgr-hp53輻射誘導(dǎo)表達(dá)載體的構(gòu)建及其體外抗腫瘤的作用

目的構(gòu)建輻射誘導(dǎo)表達(dá)載體pcEgr-hp53,并研究其體外穩(wěn)定轉(zhuǎn)染聯(lián)合X射線照射對(duì)人卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖的抑制作用及其凋亡的影響.方法將野生型p53cDNA全長(zhǎng)插入pcDNA3.1質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn),用Egr-I的啟動(dòng)子替代pcDNA3.1質(zhì)粒的CMV啟動(dòng)子,構(gòu)建成pcEgr-hp53重組質(zhì)粒;通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染法將重組質(zhì)粒pcEgrhp53和pcDNA3.1分別轉(zhuǎn)染入SKOV3細(xì)胞株,細(xì)胞株命名為SKOV3-hp53及SKOV3-vect,并經(jīng)G418篩選穩(wěn)定克隆并擴(kuò)增培養(yǎng),兩組接受不同劑量X射線照射,觀察其對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)及其凋亡的影響.結(jié)果經(jīng)限制性?xún)?nèi)切酶酶切鑒定,輻射誘導(dǎo)表達(dá)載體pcEgr-hp53構(gòu)建正確,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pcEgr-hp53聯(lián)合X-射線照射可明顯抑制腫瘤細(xì)胞的增殖,并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡.結(jié)論本研究成功構(gòu)建了輻射誘導(dǎo)表達(dá)載體pcEgr-hP53,體外基因-放射聯(lián)合治療誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡明顯增多,具有顯著的腫瘤抑制作用.本研究將為提高臨床惡性腫瘤放療療效奠定了理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).

作 者： 董麗華 付士波 楊英 劉揚(yáng) 龔守良   作者單位： 董麗華(吉林大學(xué)第一醫(yī)院;吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院)

付士波,楊英,劉揚(yáng),龔守良(吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院) 

刊 名： 中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS  年，卷(期)： 2006 10(2)  分類(lèi)號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： pcEgr-hp53載體   腫瘤   基因-放射治療  

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