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體外誘導(dǎo)人臍血CD34+細(xì)胞向肝細(xì)胞的分化

時(shí)間:2023-04-26 20:28:23 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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體外誘導(dǎo)人臍血CD34+細(xì)胞向肝細(xì)胞的分化

目的探討在體外培養(yǎng)條件下人臍血CD34+細(xì)胞向肝細(xì)胞的分化.方法用磁性細(xì)胞分選試劑盒(MACS)分離出CD34+細(xì)胞后在含50 mL/LFBS,1×ITS,4.7 mg/L亞油酸,10-4mol/L2-磷酸抗壞血酸的低糖型DMEM中培養(yǎng),并以FGF4(100μg/L)、HGF(20μg/L)進(jìn)行誘導(dǎo).分別于生長(zhǎng)因子刺激前和刺激8、16 d時(shí)留取細(xì)胞.通過RT-PCR對(duì)ALB、AFP、GATA-4等mRNA的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè);用免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)ALB蛋白的表達(dá),并收集培養(yǎng)液測(cè)定ALB的質(zhì)量濃度.結(jié)果流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示CD34+細(xì)胞的平均分離純度>90%,達(dá)到分離要求.RT-PCR檢測(cè)到誘導(dǎo)后的CD34+細(xì)胞表達(dá)ALB、AFP、GATA4 mRNA.免疫細(xì)胞化學(xué)染色可見誘導(dǎo)16 d的CD34+細(xì)胞出現(xiàn)ALB陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞,ELISA檢測(cè)表明誘導(dǎo)組8、16 d培養(yǎng)液中的ALB質(zhì)量濃度明顯增高,與誘導(dǎo)前和未誘導(dǎo)組相比均有顯著差異(P<0.01).結(jié)論在體外培養(yǎng)條件下,臍血CD34+造血干細(xì)胞可分化為表達(dá)白蛋白的類肝細(xì)胞.

作 者: 張芳婷 葉靜 萬匯涓 龍霞 聶李平 于潔 房家智 Zhang Fangting Ye Jing Wan Huijuan Long Xia Nie Liping Yu Jie Fang Jiazhi   作者單位: 北京大學(xué)深圳醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室,深圳,518036  刊 名: 西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)  ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)  年,卷(期): 2006 27(2)  分類號(hào): Q254  關(guān)鍵詞: 臍血CD34+細(xì)胞   肝細(xì)胞   分化  

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