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噬菌體改組庫的構(gòu)建及高活性水蛭素變異體的篩選
目的: 運用DNA家族改組方法提高水蛭素的抗凝血酶活性.方法: 將水蛭素HV1、 HV2、 HV3基因等量混合, 用DNase I消化, 回收50 bp左右的片段, 再經(jīng)無引物和有引物PCR擴增獲得與原基因大小相同的改組分子, 構(gòu)建噬菌體展示的水蛭素改組文庫, 經(jīng)凝血酶親和淘選, ELISA篩選高活性的水蛭素變異體.結(jié)果: 經(jīng)過DNA改組和噬菌體親和篩選, 成功獲得抗凝血酶活性提高的水蛭素變異體HV2-N47K.結(jié)論: 用DNA家族改組及親和淘選技術(shù)能夠篩選出高活性的水蛭素變異體蛋白, 這為其他分子的改組提供了借鑒.
作 者： 龍銦 劉家云 劉莉 王宗仁 LONG Yin LIU Jia-yun LIU Li WANG Zong-ren 作者單位： 龍銦,王宗仁,LONG Yin,WANG Zong-ren(第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院中醫(yī)科,陜西,西安,710032)劉家云,LIU Jia-yun(第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院檢驗科,陜西,西安,710032)
劉莉,LIU Li(第四軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)系藥理學(xué)教研室,陜西,西安,710032)
刊 名： 細胞與分子免疫學(xué)雜志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(2) 分類號： Q81 關(guān)鍵詞： 水蛭素 DNA改組 親和淘選【噬菌體改組庫的構(gòu)建及高活性水蛭素變異體的篩選】相關(guān)文章：
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