自制顯示系統(tǒng)檢測免疫印跡中的目的蛋白

目前蛋白免疫印跡顯示系統(tǒng)有顯色法和化學發(fā)光法,因化學發(fā)光法具有靈敏、快速、準確等特點而倍受科研工作者的青睞,但一般商品化的化學發(fā)光試劑盒價格頗為昂貴,為此,在參考文獻的基礎上作了一些改進,將Tris-Cl的pH值從7.5提高到11.0,同時提高了對碘苯酚的濃度(從1mmol/L提高到2mmol/L),得到了自制的化學發(fā)光試劑.首先用其檢測了大腸桿菌中表達的2種不同分子量的蛋白(gam,13kDa;bet,30kDa),發(fā)現當蛋白上樣量為2～20ng時,各蛋白條帶均清晰顯示.隨后的斑點免疫印跡實驗表明:自制及進口化學發(fā)光試劑在檢測酶標二抗效價方面有著同樣高的敏感性.

作 者： 張曉楠 陳南春 程司堃 張延鳳 ZHANG Xiao-nan CHEN Nan-chun CHENG Si-kun ZHANG Yan-feng   作者單位： 張曉楠,陳南春,ZHANG Xiao-nan,CHEN Nan-chun(中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學生物化學與分子生物學教研室,西安,710032)

程司堃,CHENG Si-kun(中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學免疫學教研室,西安,710032)

張延鳳,ZHANG Yan-feng(中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學藥理學教研室,西安,710032) 

刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(2)  分類號： Q3  關鍵詞： 免疫印跡   辣根過氧化物酶   Western blot   gam蛋白   bet蛋白  

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