β淀粉樣肽單克隆抗體可變區(qū)基因的5RACE擴增及序列分析

目的:克隆并分析抗β淀粉樣肽單克隆抗體輕鏈與重鏈可變區(qū)基因.方法:從分泌抗β淀粉樣肽單克隆抗體的雜交瘤細胞株A8中提取總RNA,根據(jù)恒定區(qū)序列設(shè)計基因特異性引物,通過5'RACE法擴增抗體的輕鏈和重鏈可變區(qū)基因,測定并分析可變區(qū)基因序列,并克隆入pMD18-T載體.結(jié)果:重鏈可變區(qū)基因序列全長450 bp,編碼150個氨基酸殘基;輕鏈可變區(qū)基因序列全長429 bp,編碼143個氨基酸殘基.在GeneBank中對氨基酸序列進行比對分析,二者均符合小鼠IgG可變區(qū)基因的特征.根據(jù)Kabat法則對A8抗體輕鏈和重鏈可變區(qū)氨基酸序列基因進行分析并確定了3個抗原互補決定區(qū)(CDR)、4個框架區(qū)(FR)和信號肽.結(jié)論:通過5'RACE法得到了抗β淀粉樣肽單克隆抗體輕鏈與重鏈可變區(qū)基因,為進一步研究抗體三維結(jié)構(gòu),以及對該抗體進行人源化改造奠定了基礎(chǔ).

作 者： 王鑫 張瑩 何金生 WANG Xin ZHANG Ying HE Jin-Sheng   作者單位： 北京交通大學,生物科學與技術(shù)研究所,北京,100044  刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： β淀粉樣肽   單克隆抗體   可變區(qū)序列   5'RACE  

【β淀粉樣肽單克隆抗體可變區(qū)基因的5RACE擴增及序列分析】相關(guān)文章：

人溶菌酶基因cDNA的克隆和序列分析04-26

奶山羊β-乳球蛋白基因5、3調(diào)控區(qū)的克隆和序列分析04-26

柞蠶Dsx基因的體外擴增04-27

蝦夷扇貝β-actin基因的克隆和序列分析04-26

貉白介素-18(IL-18)基因的克隆及序列分析04-27

部分蔬菜CMV分離物CP基因的克隆及序列分析04-27

黃粉蟲抗凍蛋白基因TmAFP84的克隆和序列分析04-26

稀有(魚句)鯽(Rare gudgeon)Sox基因的克隆及序列分析04-26

飾紋姬蛙7個Sox基因的克隆及序列分析04-27

太湖新銀魚mtDNA COⅡ和Cytb基因的克隆與序列分析04-26