奶山羊細(xì)菌人工染色體基因文庫構(gòu)建的初步研究

細(xì)菌人工染色體(BAC)文庫是進(jìn)行動物基因組學(xué)研究的一個重要手段,為配合山羊乳腺生物反應(yīng)器的研究,對構(gòu)建山羊基因組BAC文庫進(jìn)行了初步研究.用HindⅢ酶對莎能奶山羊基因組進(jìn)行部分酶切,用CHEF (箝位勻強(qiáng)電場)二次電泳法回收150 kb大小條帶,電透析回收高分子量(HMW) DNA;同時以BAC載體pBeloBAC11為材料,分別采用限制性內(nèi)切酶HindⅢ和HK脫磷酶對其進(jìn)行酶切和脫磷,將該載體自連并通過凝膠回收線性段DNA,獲得了可用于構(gòu)建BAC文庫的線性載體.將HMW與載體進(jìn)行連接,電擊轉(zhuǎn)化感受態(tài)DH10β大腸桿菌,一次轉(zhuǎn)化得到近2000個克隆.插入片段大小為50～200 kb,基本滿足建庫的需要.

作 者： 鞠輝明 張信軍 李貴陽 劉宗平 成勇 JU Hui-ming ZHANG Xin-jun LI Gui-yang LIU Zong-ping CHENG Yong   作者單位： 揚(yáng)州大學(xué),獸醫(yī)學(xué)院,江蘇,揚(yáng)州,225009  刊 名： 揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 27(3)  分類號： Q786 S852.61  關(guān)鍵詞： 山羊   細(xì)菌人工染色體   文庫構(gòu)建  

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