誘騙受體DcR3的基因構(gòu)建、表達及特異性鑒定

目的: 構(gòu)建適于原核表達的人誘騙受體DcR3基因, 并進行重組蛋白的表達純化及特異性鑒定.方法: 查得人DcR3 Cdna全序列, 將其分段設(shè)計引物, 通過重疊PCR獲得DcR3基因.構(gòu)建Pet-22b(+)/DcR3表達載體, 轉(zhuǎn)化大腸桿菌Rosseta-gami, IPTG誘導表達, Ni柱純化.采用ELISA進行特異性鑒定.結(jié)果: 通過重疊PCR獲得了編碼正確氨基酸序列的目的基因.目的蛋白以包涵體的形式表達, 表達量占菌體總蛋白的30%以上.純化后, 蛋白純度達95%以上.ELISA結(jié)果表明所純化的蛋白可與抗DcR3抗體發(fā)生特異結(jié)合.結(jié)論: 誘騙受體DcR3基因的成功構(gòu)建、表達及純化, 為進一步的功能研究奠定了基礎(chǔ).

作 者： 李文珠 陶惠然 顏江華 張長弓 蘇金華 王階平 楊桂旺 莊國洪   作者單位： 李文珠,王階平,楊桂旺,莊國洪(廈門大學生命科學學院,福建,廈門,361005)

陶惠然,顏江華,張長弓,蘇金華(廈門大學醫(yī)學院抗癌研究中心,福建,廈門,361005) 

刊 名： 細胞與分子免疫學雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(2)  分類號： Q786  關(guān)鍵詞： DcR3   基因構(gòu)建   基因表達  

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