改良手工顯微切割法獲取特定細(xì)胞提取高質(zhì)量RNA

探討顯微切割過(guò)程中有效保持RNA完整性的組織固定方法,建立一種簡(jiǎn)易的手工顯微切割法.應(yīng)用自制"T形板"輔助冰凍切片,100%無(wú)水乙醇一次性脫水固定,"排除切割法"獲取目的細(xì)胞,用TRIzol提取RNA,瓊脂糖凝膠電泳和RT-PCR分析RNA質(zhì)量."一步法"固定可長(zhǎng)時(shí)間保存RNA的完整性;從食管癌標(biāo)本5個(gè)特定階段的細(xì)胞中提取的RNA,經(jīng)電泳和RT-PCR分析均具有較高的質(zhì)量.無(wú)水乙醇"一步法"固定,在顯微切割的過(guò)程中可有效保持RNA的完整性;T形板和"排除切割法"簡(jiǎn)化了手工顯微切割的操作,提取的RNA質(zhì)、量均可滿(mǎn)足后續(xù)分子水平研究的需要.

作 者： 周廣彪 胡盛平 劉靜文 張可浩 官兵 吳名耀 沈忠英 楊捷生 ZHOU Guang-Biao HU Sheng-Ping LIU Jing-Wen ZHANG Ke-Hao GUAN Bing WU Ming-Yao SHEN Zhong-Ying YANG Jie-Sheng   作者單位： 周廣彪,胡盛平,劉靜文,張可浩,官兵,ZHOU Guang-Biao,HU Sheng-Ping,LIU Jing-Wen,ZHANG Ke-Hao,GUAN Bing(汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院,分子生物學(xué)中心,汕頭,515031)

吳名耀,沈忠英,WU Ming-Yao,SHEN Zhong-Ying(汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院,病理學(xué)教研室,汕頭,515031)

楊捷生,YANG Jie-Sheng(汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院,腫瘤醫(yī)院胸外科,汕頭,515031) 

刊 名： 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(3)  分類(lèi)號(hào)： Q522.2  關(guān)鍵詞： 食管癌   組織固定   顯微切割   RNA提取  

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