金環(huán)蛇L-氨基酸氧化酶誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的研究

目的:探討金環(huán)蛇毒中L-氨基酸氧化酶對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(HUVCE)增殖和凋亡作用的影響.方法:通過陽(yáng)離子交換層析和肝素親和層析從金環(huán)蛇蛇毒中分離純化到一個(gè)L-氨基酸氧化酶,SDS電泳鑒定其純度.SDS電泳和HPLC凝膠過濾確定其分子量,并采用MTT法、流式細(xì)胞術(shù)、激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)L-氨基酸氧化酶對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株生長(zhǎng)情況、細(xì)胞周期以及細(xì)胞形態(tài)的影響.結(jié)果:通過兩步層析法從金環(huán)蛇毒中分離得到L-氨基酸氧化酶,L-氨基酸氧化酶的表觀分子量通過SDS-PAGE測(cè)定約為60 kD,通過凝膠過濾測(cè)定分子量為70kD.L-氨基酸氧化酶作用于HUVCE細(xì)胞12 h后,細(xì)胞的生長(zhǎng)明顯受到抑制,L-氨基酸氧化酶作用的半數(shù)抑制量為2.8 mg/L.流式細(xì)胞儀直方圖上可見明顯的亞二倍體峰,隨著L-氨基酸氧化酶作用濃度的增加,凋亡率增加(P<0.05),細(xì)胞分裂增殖指數(shù)降低(P<0.05);激光共聚焦顯微鏡觀察0.03 mg/L的L-氨基酸氧化酶作用12 h細(xì)胞出現(xiàn)早期凋亡,3 mg/L的L-氨基酸氧化酶作用12 h細(xì)胞核濃縮,部分細(xì)胞碎裂.結(jié)論:通過兩步層析法從金環(huán)蛇毒中分離得到L-氨基酸氧化酶,該氨基酸氧化酶是由單亞基組成的.L-氨基酸氧化酶能誘導(dǎo)HUVCE凋亡從而對(duì)其生長(zhǎng)具有抑制作用.

作 者： 魏繼福 楊海偉 喬麗雅 魏曉龍 何韶衡 WEI Ji-fu YANG Hai-wei QIAO Li-ya WEI Xiao-long HE Shao-heng   作者單位： 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院變態(tài)反應(yīng)學(xué)與炎癥反應(yīng)學(xué)研究所,廣東,汕頭,515031  刊 名： 中國(guó)病理生理雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(2)  分類號(hào)： Q51  關(guān)鍵詞： 氨基酸氧化酶   內(nèi)皮細(xì)胞   細(xì)胞周期   細(xì)胞凋亡  

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