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大腸桿菌P蛋白和T蛋白的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域互換研究
在細菌、真菌及植物中,分支酸是一種位于關(guān)鍵分叉點上的中間代謝物,是所有芳香族氨基酸合成的共同前體.它可在雙功能酶分支酸變位酶(CM)和預苯酸脫水酶(PDT)的催化下合成苯丙氨酸,在另一個雙功能酶分支酸變位酶和預苯酸脫氫酶(PDH)的催化下合成酪氨酸.前者被稱為P蛋白,后者被稱為T蛋白.大腸桿菌P蛋白和T蛋白有著類似的結(jié)構(gòu),P蛋白由CMp、PDT和調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域3個獨立結(jié)構(gòu)域組成,其變構(gòu)調(diào)節(jié)因子是苯丙氨酸.T蛋白只有CMt和PDH兩個獨立結(jié)構(gòu)域組成,起變構(gòu)調(diào)節(jié)作用的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域與PDH密不可分,其變構(gòu)調(diào)節(jié)因子是酪氨酸.為了研究P蛋白和T蛋白的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域的變構(gòu)調(diào)節(jié)作用,應(yīng)用融合蛋白技術(shù)將P蛋白和T蛋白的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域進行了互換.結(jié)果發(fā)現(xiàn),互換了的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域仍然具有變構(gòu)調(diào)節(jié)作用,而且調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域的互換導致了變構(gòu)調(diào)節(jié)因子的互換,說明調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域?qū)γ富钚缘恼{(diào)節(jié)作用是非專一的,而其R結(jié)構(gòu)域與調(diào)節(jié)因子的結(jié)合卻是專一的.
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