重組阿拉伯糖苷酶在畢赤酵母中的分泌表達(dá)及其活性分析

假密環(huán)菌是一種果樹腐病菌,具有較強(qiáng)的分解代謝纖維素的能力.根據(jù)已克隆出的阿拉伯糖苷酶基因序列(Accession Number AJ620046)設(shè)計(jì)引物從假密環(huán)菌的mRNA中克隆出阿拉伯糖苷酶的ORF片段,構(gòu)建重組質(zhì)粒pPIC9-AF,與組氨酸標(biāo)簽融合,電轉(zhuǎn)化畢赤酵母菌GS115并進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá).所得到的重組阿拉伯糖苷酶在30～35℃時(shí)有較高的酶活,最適反應(yīng)活性pH值在6.0～8.0之間,而在pH4.O～8.0范圍內(nèi)酶活基本保持在80%以上,比大多已報(bào)道的阿拉伯糖苷酶最適pH范圍寬.對(duì)于高效表達(dá)重組阿拉伯糖苷酶以及對(duì)其進(jìn)一步的酶學(xué)性質(zhì)研究提供了良好的基礎(chǔ).

作 者： 姚冬生 譚慧媚 黃輝 劉大嶺 謝春芳 YAO Dong-sheng TAN Hui-mei HUANG Hui LIU Da-ling XIE Chun-fang   作者單位： 暨南大學(xué),生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,生物技術(shù)室,廣州,510632  刊 名： 中國(guó)生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(4)  分類號(hào)： Q814  關(guān)鍵詞： 假密環(huán)菌   阿拉伯糖苷酶   畢赤酵母   分泌表達(dá)  

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