蚯蚓纖溶酶(EFE-3D)基因的合成及其在畢赤酵母中的表達

選擇畢赤酵母偏愛密碼子,分成32個長約48 bp且相互配對的寡核苷酸片段,合成蚯蚓纖溶酶基因EFE-3D.寡核苷酸片段經5'磷酸化后,通過錯位拼接,PCR(聚合酶鏈式反應)一次性完成新基因的合成并且克隆至載體pPIC9K中.最后利用電穿孔法將新基因克隆至畢赤酵母表達系統(tǒng)并進行誘導表達,用免疫印記法檢測表達產物,最后利用纖維平板確定其表達產物的活性為3 500 mm2/mL,1 L發(fā)酵液相當于48 mg天然蚯蚓纖溶酶活性.

作 者： 秦奕輝 儲炬 黃文華 莊英萍 張嗣良 QIN Yi-hui CHU Ju HUANG Wen-hua ZHUANG Ying-ping ZHANG Si-liang   作者單位： 秦奕輝,儲炬,莊英萍,張嗣良,QIN Yi-hui,CHU Ju,ZHUANG Ying-ping,ZHANG Si-liang(華東理工大學生物反應器工程國家重點實驗室,上海,200237)

黃文華,HUANG Wen-hua(上海國源生物技術有限公司,上海,200233) 

刊 名： 華東理工大學學報（自然科學版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF EAST CHINA UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 32(4)  分類號： Q55  關鍵詞： 畢赤酵母   蚯蚓纖溶酶   基因合成   密碼子偏好性  

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