肝細(xì)胞表面去唾液酸糖蛋白受體的流式細(xì)胞分析

建立肝細(xì)胞表面去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)的流式細(xì)胞分析方法(FCM),對正常及損傷鼠肝細(xì)胞、肝癌細(xì)胞(BEL-7402)表面的ASGPR作同步比較分析.以異硫氰酸熒光素標(biāo)記的新半乳糖白蛋白(FITC-NGA)為ASGPR的特異性配體,以培養(yǎng)的正常肝細(xì)胞(L-02)為靶細(xì)胞,建立肝細(xì)胞表面ASGPR的FCM.測定并計(jì)算正常及損傷鼠肝細(xì)胞,BEL-7402細(xì)胞與同一濃度的FITC-NGA同步反應(yīng)后的平均熒光強(qiáng)度(MIF)值.FITC-NGA與L-02細(xì)胞表面ASGPR趨近飽和結(jié)合的濃度為0.4 mg/L,該濃度下正常及損傷鼠肝細(xì)胞,BEL-7402細(xì)胞的MIF值分別為228.7、5.81、1.13.該結(jié)合可以被至少50倍于FITC-NGA的NGA或10 mmol/L的EDTA完全抑制.FCM能夠良好地揭示FITC-NGA同ASGPR之間的受配體結(jié)合特性.該方法證實(shí)BEL-7402細(xì)胞表面幾乎沒有ASGPR,損傷鼠肝細(xì)胞表面ASGPR的數(shù)量較正常鼠肝細(xì)胞顯著減少.

作 者： 李文新 張榮軍 譚成 陶永輝 金堅(jiān) LI Wen-Xin ZHANG Rong-Jun TAN Cheng TAO Yong-Hui JIN Jian   作者單位： 江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所,核醫(yī)學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,無錫,214063  刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(4)  分類號： Q24  關(guān)鍵詞： 肝細(xì)胞   新半乳糖白蛋白   去唾液酸糖蛋白受體   流式細(xì)胞分析   熒光強(qiáng)度  

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