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以花藥愈傷組織為受體的水稻轉化和RNA干擾研究
在優(yōu)化花培誘導培養(yǎng)基成分的基礎上,通過延長花藥愈傷組織在誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)的時間和降低共培養(yǎng)過程中農桿菌濃度等,成功地建立了以花藥愈傷組織為受體的農桿菌轉化體系.并將白葉枯菌抗性基因Xa21作為該體系的模式基因導入到多個粳稻品種的花藥愈傷組織中,共得到了145個獨立的轉基因株系.分子檢測和田間抗性檢測發(fā)現(xiàn)其中的140個株系的基因組含有外源的Xa21基因,包括單倍體45株、二倍體87株和混倍體植株8株.根據(jù)后代性狀分離比和染色體的FISH分析可以確定,在87個二倍體植株中有15株為純合的加倍單倍體轉基因植株;再加上田間自然加倍和由秋水仙堿處理單倍體所獲得的28株加倍單倍體,共得到了43個純合的加倍單倍體轉基因株系.還將該轉化體系用于反向遺傳學的研究.一個在植物體內能轉錄產(chǎn)生雙鏈RNA(double strand RNA,dsRNA)發(fā)夾結構的質粒pZ2RNAi被導入到水稻單倍體基因組中,該dsRNA的靶目標是水稻的OsMADS2基因的轉錄物,結果表明,在轉pZ2RNAi的單倍體水稻中,靶基因OsMADS2的表達被特異地抑制,并導致花器官形態(tài)的明顯改變.因此,單倍體轉化體系與RNAi技術相結合有可能成為在水稻和其他植物中功能基因組研究的一個新途徑.
夏志輝,李曉兵,翟文學,程祝寬,朱立煌(中國科學院遺傳與發(fā)育物學研究所,植物基因組學國家重點實驗室,北京,100101)
刊 名： 中國科學C輯 ISTIC PKU 英文刊名： SCIENCE IN CHINA (SERIES C) 年，卷(期)： 2006 36(4) 分類號： Q5 關鍵詞： 水稻 花藥培養(yǎng) 遺傳轉化 單倍體 RNA 干擾【以花藥愈傷組織為受體的水稻轉化和RNA干擾研究】相關文章：
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