基因重組大腸桿菌表達(dá)截短型pZP3β的發(fā)酵條件優(yōu)化

目的:對(duì)已構(gòu)建好的表達(dá)pZP3β蛋白(pZP130)工程菌的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,通過(guò)在5 L罐中發(fā)酵和Ni柱純化,以期獲取較大量目的產(chǎn)物.方法:在搖瓶中改變不同的培養(yǎng)及誘導(dǎo)條件,比較工程菌的生長(zhǎng)和目的蛋白的表達(dá),優(yōu)化發(fā)酵條件;并在5 L發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵,獲得菌體,破碎后進(jìn)行Ni柱純化.結(jié)果:優(yōu)化的發(fā)酵條件是:10%的接種量,加入2%甘油的培養(yǎng)基培養(yǎng)菌體3 h后加入0.5 mmol/L IPTG,誘導(dǎo)4 h后收樣.在5 L發(fā)酵罐中發(fā)酵,獲得菌體量36g/L,經(jīng)Ni柱純化,獲得蛋白粗制品33 mg/L發(fā)酵液.結(jié)論:截短型pZP3β蛋白可以在E coli中獲得較高表達(dá),并且可以通過(guò)發(fā)酵和Ni柱純化得到較大量的蛋白,這有助于pZP的深入研究和應(yīng)用.

作 者： 謝秋玲 陳小佳 朱偉杰 趙振云 吳建虹 徐萬(wàn)祥 劉侃 李菁 Qiu-ling XIE Xiao-jia CHEN Wei-jie ZHU Zhen-yun ZHAO Jian-hong WU Wan-xiang XU Kan LIU Jing LI   作者單位： 謝秋玲,吳建虹,劉侃,Qiu-ling XIE,Jian-hong WU,Kan LIU(暨南大學(xué)生物工程研究所,廣州,510632)

陳小佳,Xiao-jia CHEN(廣東省生物工程藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州,510632)

朱偉杰,Wei-jie ZHU(暨南大學(xué)生殖免疫研究中心,廣州,510632)

趙振云,Zhen-yun ZHAO(暨南大學(xué)生物系,廣州,510632)

徐萬(wàn)祥,Wan-xiang XU(上海市計(jì)劃生育科學(xué)研究所,上海,200032)

李菁,Jing LI(暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院,廣州,510632) 

刊 名： 生殖與避孕  ISTIC PKU 英文刊名： REPRODUCTION AND CONTRACEPTION  年，卷(期)： 2006 26(4)  分類號(hào)： Q819  關(guān)鍵詞： 截短型   豬卵透明帶-3β   大腸桿菌   表達(dá)   發(fā)酵  

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