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CD147 shRNA質(zhì)粒表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定
目的 構(gòu)建表達(dá)細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(CD147,EMMPRIN)基因序列特異性的短發(fā)夾樣RNA(short hairpin RNA,shRNA)載體.方法 根據(jù)CD147基因序列及shRNA設(shè)計原則,化學(xué)合成兩段編碼短發(fā)夾RNA寡核苷酸序列,將其定向克隆到pGenesil-1.1質(zhì)粒表達(dá)載體中,重組構(gòu)建RNAi質(zhì)粒,并對重組質(zhì)粒進行酶切分析.結(jié)果 限制性內(nèi)切酶Eeo31I和SacI酶切顯示設(shè)計合成的shRNA編碼序列被成功插入pGenesil-1.1質(zhì)粒載體中,酶切結(jié)果證實插入片段與設(shè)計序列完全一致,成功構(gòu)建針對基因CD147的shRNA質(zhì)粒表達(dá)載體.結(jié)論 成功構(gòu)建人CD147基因重組載體,為研究CD147蛋白的生物學(xué)效應(yīng)和骨肉瘤的治療提供實驗依據(jù).
作 者: 逯強 呂剛 王巖峰 薛義軍 作者單位: 逯強(中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨科,遼寧沈陽,110001;華北煤炭醫(yī)學(xué)院附屬骨科醫(yī)院,河北唐山,063000)呂剛,王巖峰(中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨科,遼寧沈陽,110001)
薛義軍(中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院泌尿外科,遼寧沈陽,110001)
刊 名: 解剖科學(xué)進展 ISTIC 英文刊名: PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES 年,卷(期): 2010 16(3) 分類號: Q782 R738 關(guān)鍵詞: CD147 shRNA 質(zhì)粒 載體 RNAi【CD147 shRNA質(zhì)粒表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定】相關(guān)文章:
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