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體外分離培養(yǎng)小鼠胃Cajal間質(zhì)細胞的實驗方法研究
目的 對KM小鼠胃Cajal間質(zhì)細胞進行體外分離、培養(yǎng),并對其進行鑒定,摸索高效實用的方法,為進一步探索研究Cajal間質(zhì)細胞的移植、替代治療及藥物實驗提供基礎(chǔ).方法 以KM株小鼠胃為組織來源,體外分離、培養(yǎng)ICC,并進行細胞傳代,光鏡下觀察其形態(tài),用熒光標記C-Kit特異性抗體標記細胞,進行免疫組化鑒定.結(jié)果 細胞穩(wěn)定貼壁后,形成梭形或三角形突起,3 d后可出現(xiàn)長突起,并可逐漸形成網(wǎng)絡(luò)連接.結(jié)論 酶解法分離細胞成功,但純度低,數(shù)量不足;體外培養(yǎng)ICC 24 h后逐漸穩(wěn)定貼壁,3 d以后可形成網(wǎng)絡(luò)連接,可穩(wěn)定培養(yǎng)3周以上;傳代后細胞正常形態(tài)逐漸發(fā)生變化,20 d后可逐漸凋亡.
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