利用小干擾RNA表達(dá)框鑒定小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞有效沉默RelB基因的實(shí)驗(yàn)研究

目的構(gòu)建靶向小鼠RelB基因的小干擾RNA(siRNA)表達(dá)框,鑒定針對小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞(DC)的RelB基因最有效的siRNA序列.方法利用PCR方法構(gòu)建3個(gè)不同位點(diǎn)的表達(dá)框,R1/siRNA、R2/siRNA和R3/siRNA分別位于1027、302和1121位點(diǎn).利用陽離子脂質(zhì)體AdvantGene轉(zhuǎn)染小鼠骨髓DC,轉(zhuǎn)染24h后,脂多糖(LPS)刺激DC,用RT-PCR和免疫熒光方法檢測DC RelB基因表達(dá)的變化.結(jié)果經(jīng)LPS刺激后DC成熟,RelB基因表達(dá)顯著高于未成熟DC;R1/siRNA和R3/siRNA轉(zhuǎn)染DC后,LPS刺激仍然可以增強(qiáng)RelB基因表達(dá),而R2/siRNA轉(zhuǎn)染DC后,LPS刺激不能增加RelB基因表達(dá).結(jié)論R2/siRNA可有效抑制RelB基因表達(dá),有望用于構(gòu)建新的耐受性DC應(yīng)用于臨床免疫耐受的誘導(dǎo).

作 者： 鄭磊 包杰 王前 楊紅玲 裘宇容 ZHENG Lei BAO Jie WANG Qian YANG Hong-ling QIU Yu-rong   作者單位： 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東,廣州,510515  刊 名： 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： siRNA   樹突狀細(xì)胞   RelB   免疫耐受  

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