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體外重折疊核糖核酸酶A及其熒光結(jié)構(gòu)表征

時(shí)間:2023-04-30 17:10:03 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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體外重折疊核糖核酸酶A及其熒光結(jié)構(gòu)表征

核糖核酸酶A(RNase A)作為蛋白質(zhì)體外重折疊研究的模型蛋白,考察了稀釋復(fù)性過程中脲濃度、稀釋倍數(shù)、氧化還原環(huán)境(GSH濃度和GSH/GSSG比例)、pH值、溫度以及聚集抑制劑的添加對(duì)該酶活性回收率的影響.在變性蛋白濃度為100 μg·mL-1,復(fù)性液含有2 mol·L-1脲,GSH濃度2 mmol·L-1,GSH/GSSG比為4:1,pH8.0,并添加終濃0.1%的PEG,轉(zhuǎn)速為150 r·min-1,溫度37℃的條件下復(fù)性,RNase A的活力回收率可達(dá)70%以上.利用熒光分析法對(duì)RNase A復(fù)性過程的結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行了表征,在此基礎(chǔ)上對(duì)RNase A體外重折疊過程蛋白質(zhì)分子的構(gòu)象變化以及活性中心的形成過程進(jìn)行了闡述.

作 者: 譚培生 羅曼 盛清 關(guān)怡新 姚善涇 TAN Pei-sheng LUO Man SHENG Qing GUAN Yi-xin YAO Shan-jing   作者單位: 譚培生,羅曼,關(guān)怡新,姚善涇,TAN Pei-sheng,LUO Man,GUAN Yi-xin,YAO Shan-jing(浙江大學(xué),化學(xué)工程與生物工程學(xué)系,浙江,杭州,310027)

盛清,SHENG Qing(浙江理工大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,浙江,杭州,310018) 

刊 名: 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版)  ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)  年,卷(期): 2006 32(5)  分類號(hào): Q518.4  關(guān)鍵詞: 核糖核酸酶A   稀釋復(fù)性   熒光分析法   分子結(jié)構(gòu)  

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