截短型細胞毒素Gelonin的分子構象和生物活性

為了探索免疫絡合物中具殺傷靶細胞的毒素,gelonin的結構與功能的關系,根據化學合成的gelonin基因序列和3維分子構象設計了N端區(qū)Gly,Leu,Asp和/或C端區(qū)Asp,Lys,Asp,Pro,Lys缺失的gelonin.以重組質粒pE-gel為模板,在相應引物存在下,用PCR法獲得5'端區(qū)和/或3'端區(qū)堿基序列缺失的gelonin基因片段.經克隆、表達和純化得到3種截短型gelonin(G-N3、G-C5、G-N3C5).CD譜和熒光譜表明,完整型gelonin(G-O)與截短型gelonin的分子構象有明顯的差異.它們的構象變化與類DNase活性和抑制腫瘤細胞生長的能力均為G-O≥G-N3＞G-C5＞G-N3C5.結果再一次證明了具有α+β型結構蛋白,gelonin的構象與生物活性的一致性.

作 者： 蘧艷峰 李卓玉 郭晨云 郭素堂 史天良 袁靜明 QU Yan-Feng LI Zhuo-Yu GUO Chen-Yun GUO Su-Tang SHI Tian-Liang YUAN Jing-Ming   作者單位： 蘧艷峰,李卓玉,袁靜明,QU Yan-Feng,LI Zhuo-Yu,YUAN Jing-Ming(教育部化學生物學與分子工程重點實驗室,生物技術研究所,山西大學,太原,030006)

郭晨云,GUO Chen-Yun(中國科學院上海藥物研究所,上海,201203)

郭素堂,史天良,GUO Su-Tang,SHI Tian-Liang(山西省腫瘤研究所,太原,030013) 

刊 名： 中國生物化學與分子生物學報  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(5)  分類號： Q78  關鍵詞： 截短型gelonin   純化   構象   類DNase活性   腫瘤細胞抑制  

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