RNA干擾對小鼠脾淋巴細胞分泌TNF-α的影響

目的:探討小干擾RNA(siRNA)對小鼠脾淋巴細胞分泌的腫瘤壞死因子α(TNF-α)的抑制效果.方法:體外PCR擴增合成針對TNF-α靶位點的DNA表達盒,轉(zhuǎn)染經(jīng)脂多糖(LPS)激活的小鼠脾淋巴細胞,在細胞內(nèi)源性RNA聚合酶Ⅲ作用下轉(zhuǎn)錄形成siRNA,誘發(fā)目標mRNA的降解.于轉(zhuǎn)染后48 h收集細胞培養(yǎng)上清.TNF-α濃度用ELISA方法測定.結(jié)果:與空白對照組和無關干擾組相比,干擾組TNF-α分泌量明顯降低(P＜0.05),抑制率約為16%.結(jié)論:RNA干擾技術(shù)可以在原代培養(yǎng)的小鼠脾淋巴細胞中發(fā)揮特異性干擾作用,產(chǎn)生抑制TNF-α分泌的效果,為TNF-α的基因治療開拓新途徑.

作 者： 鄭寧寧 丁旭東 宋曉宇 杜莉莉 孫杰 金玉楠 張海鵬 ZHENG Ning-ning DING Xu-dong SONG Xiao-yu DU Li-li SUN Jie JIN Yu-nan ZHANG Hai-peng   作者單位： 鄭寧寧,宋曉宇,杜莉莉,孫杰,金玉楠,張海鵬,ZHENG Ning-ning,SONG Xiao-yu,DU Li-li,SUN Jie,JIN Yu-nan,ZHANG Hai-peng(中國醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病理生理學教研室,遼寧,沈陽,110001)

丁旭東,DING Xu-dong(中國醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院麻醉科,遼寧,沈陽,110001) 

刊 名： 中國醫(yī)科大學學報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 35(5)  分類號： Q78  關鍵詞： RNA干擾   小干擾RNA   轉(zhuǎn)錄后基因沉默   腫瘤壞死因子α  

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