一種新的雙向電泳蛋白樣品制備方法

目的 探討雙向凝膠電泳(2-DE)樣品裂解液對蛋白質(zhì)分離和雙向凝膠電泳結果 的影響.方法 以MOLT-4細胞為例,采用3種溶解性能不同的裂解液提取細胞中的蛋白質(zhì)組,并分別進行雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳.結果 通過對2-D PAGE圖譜的比較分析,發(fā)現(xiàn)采用8 mol/L Urea, 2 mol/L Thiourea,4% CHAPS, 1% NP-40,4%TritonX-100,65 mmol/L DTT, 0.5 mmol/L PMSF,0.5% pharmalyte 3-10,能獲得質(zhì)量較高的2-DE圖譜.結論 采用高濃度脲、三去污裂解液有利于獲得優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)樣品,從而提高蛋白質(zhì)提取率和雙向電泳分辨率等.

作 者： 李小蘭 謝大興 肖徽 吳劍宏 姚靜 馮永東 陶德定 劉雙又 胡俊波 龔建平   作者單位： 華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院腫瘤研究所分子醫(yī)學中心,武漢,430030  刊 名： 華中科技大學學報（醫(yī)學版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MEDICINAE UNIVERSITATIS SCIENTIAE ET TECHNOLOGIAE HUAZHONG  年，卷(期)： 2006 35(5)  分類號： Q5  關鍵詞： 蛋白質(zhì)組   雙向電泳   固相pH梯度   MOLT-4細胞  

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