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魚腥藻PCC7120藻藍(lán)蛋白α亞基體內(nèi)重組研究
為了研究藻藍(lán)蛋白α亞基的生物合成途徑,通過構(gòu)建相容的3種重組質(zhì)粒pETDuet-cpcA、pCOLADuet-cpcE-cpcF和pACYCDuet-ho1-pcyA,將裂合酶基因cpcE和cpcF、血紅素氧化酶基因ho1、藻藍(lán)膽素合成酶基因pcyA和脫輔基藻藍(lán)蛋白α亞基基因cpcA共同轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21-DE3).通過色素蛋白鋅電泳和光譜檢測(cè)表明產(chǎn)生了生物活性的CpcA-PCB.成功實(shí)現(xiàn)了大腸桿菌內(nèi)藻藍(lán)蛋白α亞基84位半胱氨酸殘基與PCB的連接.而在裂合酶基因cpcE和cpcF不轉(zhuǎn)入大腸桿菌的情況下,大腸桿菌內(nèi)只有0.2%的CpcA-PCB產(chǎn)生.以上研究為進(jìn)一步在大腸桿菌內(nèi)合成天然的藻藍(lán)蛋白奠定了基礎(chǔ).
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