噬菌體抗體庫固相篩選條件的初步研究

目的:探討噬菌體抗體庫的固相篩選條件,為篩選方案的設(shè)計(jì)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).方法:利用多種針對HEV NE2蛋白的特異性噬菌體人源抗體和非特異性噬菌體人源抗體,對噬菌體抗體與抗原的結(jié)合時間、抗原包被的濃度、洗滌強(qiáng)度和洗脫方式等多種篩選的條件進(jìn)行初步探索.結(jié)果:陽性噬菌體抗體與抗原反應(yīng)1 min,就可較好結(jié)合,洗滌次數(shù)為20～30次、洗滌液的pH為5時,篩選得到的陽性率最高.包被抗原的濃度對篩選的陽性率沒有明顯影響,用10 mg/L抗原競爭洗脫60 min,可得到較高的陽性率.結(jié)論:噬菌體抗體庫的篩選是一個非常復(fù)雜的過程,其中的各個條件之間有著密切的聯(lián)系,應(yīng)該根據(jù)具體情況進(jìn)行調(diào)整.

作 者： 王明橋 羅文新 陳瑛煒 袁權(quán) 王晉 張軍 夏寧邵 WANG Ming-qiao LUO Wen-xin CHEN Ying-wei YUAN Quan WANG Jin ZHANG Jun XIA Ning-shao   作者單位： 福建省醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)研究中心,廈門大學(xué)教育部細(xì)胞生物學(xué)與腫瘤細(xì)胞工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,福建,廈門,361005  刊 名： 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(5)  分類號： Q782  關(guān)鍵詞： 噬菌體抗體庫   固相篩選   篩選條件  

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