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大鼠脊神經(jīng)蛋白質(zhì)組研究中雙向電泳技術(shù)的建立
目的 探討雙向凝膠電泳技術(shù)在大鼠脊神經(jīng)組織蛋白質(zhì)組研究中的應(yīng)用.方法 應(yīng)用高蛋白溶解度裂解液提取正常大鼠脊神經(jīng)組織蛋白質(zhì),以固相pH梯度等電聚焦電泳和垂直板SDS-PAGE電泳結(jié)合的方法進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離,使用銀染和考馬斯亮藍(lán)兩種方法分別對凝膠進(jìn)行染色.結(jié)果 正常大鼠脊神經(jīng)組織樣品在18 cm pH 3~10非線性固相pH梯度干膠條,12.5%的Acr-Bis PAGE的膠上可分離到900個左右蛋白點,不同凝膠間蛋白點平均匹配率為80%.結(jié)論 實驗所采用的高離液劑體系的裂解液,及對第一向和第二向電泳過程中各個因素及環(huán)節(jié)的把握,是獲得大鼠脊神經(jīng)組織蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜的關(guān)鍵.
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