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曼地亞紅豆杉細胞系的建立與評價
紅豆杉(Taxus)細胞內(nèi)紫杉醇的含量低且不穩(wěn)定,限制了利用細胞培養(yǎng)大規(guī)模生產(chǎn)紫杉醇的產(chǎn)業(yè)化進程.以紫杉醇含量較高的曼地亞紅豆杉(Taxus media)為試材,誘導得到了曼地亞紅豆杉愈傷組織,在添加抗壞血酸(VC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、活性炭(activated carbon)的改良B5培養(yǎng)基上,15次反復繼代培養(yǎng)后獲得了高產(chǎn)紫杉醇的細胞系.對新建立的曼地亞紅豆杉細胞系(MC)與同期誘導的東北紅豆杉細胞系(NC)及實驗室繼代多年的中國紅豆杉細胞系(SC)在細胞生長周期、紫杉醇含量和細胞死亡率等方面進行了分析比較.結(jié)果表明,SC的生長量達5.9倍,高于MC和NC的3.6和4.2倍.在初始接種量相近的情況下,MC的懸浮培養(yǎng)細胞在一個周期內(nèi)紫杉醇產(chǎn)量可達9.5 mg/L, 經(jīng)過茉莉酸甲酯(MJ)誘導后可達到41 mg/L.
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