一種基于熒光強(qiáng)度分析的高通量定量檢測細(xì)胞凋亡方法

根據(jù)正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞的細(xì)胞膜對核酸熒光染料的不同選擇通透性,用4μmol/L YO-PRO-1(YP)和4μg/ml碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色96孔板中的細(xì)胞樣品.分別在485/538(Ex/Em,nm)和530/590(Ex/Em,nm)的檢測波長下借助熒光分光光度計(jì)檢測細(xì)胞樣品孔的YP和PI熒光強(qiáng)度.將YP和PI熒光強(qiáng)度值與用熒光顯微鏡對同一細(xì)胞樣品細(xì)胞凋亡和壞死的定量分析結(jié)果相對應(yīng),通過對YP熒光強(qiáng)度值與凋亡細(xì)胞數(shù)的直線回歸分析(r=0.999,P＜0.01),得到依據(jù)YP熒光強(qiáng)度值求得凋亡細(xì)胞數(shù)的直線相關(guān)方程.該方法可檢測出樣品中少至180個(gè)的凋亡細(xì)胞,具有靈敏度高和快速高效的特點(diǎn).

作 者： 葉玲玲 劉紅 劉興茂 李世崇 吳本傳 王啟偉 陳昭烈 YE Ling-ling LIU Hong LIU Xing-mao LI Shi-chong WU Ben-chuan WANG Qi-wei CHEN Zhao-lie   作者單位： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所細(xì)胞工程室,北京,100071  刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(6)  分類號： Q819  關(guān)鍵詞： 熒光強(qiáng)度   高通量   定量檢測   細(xì)胞凋亡  

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