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核盤菌EPSP合酶基因在大腸桿菌中的表達(dá)
不含有內(nèi)含子的核盤菌arom基因已經(jīng)被擴(kuò)增、測(cè)序.該基因編碼五功能的AROM蛋白.為了大量獲得核盤菌AROM蛋白的結(jié)構(gòu)域之一5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS),將該菌arom基因編碼脫氫奎尼酸合酶(DHQS)和EPSPS兩結(jié)構(gòu)域的DNA序列和只編碼EPSPS結(jié)構(gòu)域的DNA序列分別克隆入載體pGEX-4t-2和載體pET28b中,構(gòu)建了4個(gè)表達(dá)載體pGEX-DE、pGEX-E、pET-DE和pET-E,并將其轉(zhuǎn)入大腸桿菌DH5α、大腸桿菌BL21(DE3)或大腸桿菌JM109中表達(dá).酶活測(cè)定和SDS-PAGE分析結(jié)果顯示,上述編碼序列在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)獲得了表達(dá),含有表達(dá)載體pGEX-E、pET-DE和pET-E的大腸桿菌BL21(DE3)轉(zhuǎn)化子具有EPSPS的催化活性,說(shuō)明核盤菌arom基因的這些DNA片段可以被單獨(dú)表達(dá).核盤菌EPSPS異源表達(dá)系統(tǒng)的建立為該酶的抑制劑設(shè)計(jì)奠定了基礎(chǔ).
作 者： 于寒穎 楊謙 YU Han-ying YANG Qian 作者單位： 于寒穎,YU Han-ying(哈爾濱工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與工程系;大慶石油學(xué)院石油工程系)楊謙,YANG Qian(哈爾濱工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與工程系)
刊 名： 北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào) ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 28(6) 分類號(hào)： Q781 關(guān)鍵詞： 基因表達(dá) 核盤菌 arom基因 大腸桿菌【核盤菌EPSP合酶基因在大腸桿菌中的表達(dá)】相關(guān)文章：
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