斑馬魚促性腺激素釋放激素基因的克隆與表達

目的 克隆斑馬魚促性腺激素釋放激素(GnRH)基因,構(gòu)建重組質(zhì)粒pQE30-GnRH并獲得表達蛋白.方法 從斑馬魚腦組織提取總RNA,應(yīng)用RT-PCR方法獲得斑馬魚GnRH cDNA.將該cDNA插入質(zhì)粒pQE30中,并使其在大腸桿菌RB791中表達.經(jīng)IPTG誘導后SDS-PAGE電泳檢測蛋白的表達情況.結(jié)果 斑馬魚GnRH cDNA長為207bp,編碼的GnRH前體為69個氨基酸殘基.與鯉魚、鯽魚、擬鯉、黑頭軟口鰷等淡水鯉科魚類的氨基酸序列同源性比較,分別為74.4%,69.8%,73.3% 和 73.3%.電泳結(jié)果顯示一新的分子量約為14.4 kDa的特異蛋白帶.結(jié)論 本研究所克隆的斑馬魚GnRH基因?qū)儆贕nRH-Ⅱ.構(gòu)建斑馬魚GnRH原核表達質(zhì)粒不僅獲得大量的GnRH蛋白,還可對該蛋白做進一步分離純化以及生物活性方面的研究.

作 者： 謝保勝 段瑞君 藤原滋樹 Xie Baosheng Duan Rui Jun Shigeki Fujiwara   作者單位： 謝保勝,段瑞君,Xie Baosheng,Duan Rui Jun(青海大學生物科學系)

藤原滋樹,Shigeki Fujiwara(日本高知大學理學部) 

刊 名： 青海醫(yī)學院學報  英文刊名： JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE  年，卷(期)： 2009 30(1)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 斑馬魚   促性腺激素釋放激素   克隆   基因表達  

【斑馬魚促性腺激素釋放激素基因的克隆與表達】相關(guān)文章：

奧利亞羅非魚促性腺激素釋放激素及相關(guān)肽基因的克隆與表達04-26

促性腺激素釋放激素基因及其受體基因的研究進展04-27

牙鲆腦中促性腺激素釋放激素受體的克隆和鑒定04-29

奧利亞羅非魚促性腺激素釋放激素cDNA的原核表達及其免疫原性研究04-29

大腸桿菌RNaseⅢ基因的克隆與表達04-26

人朊蛋白基因的克隆與原核表達04-27

人類心臟特異表達基因pygol的克隆與功能研究04-26

大腸桿菌glgC基因的克隆及原核表達04-30

史氏鱘兩種促性腺激素β亞基cDNA克隆及序列進化分析04-29

豬胃蛋白酶原A基因cDNA的克隆及其表達04-29