巢式-多重RT-Reahime PCR檢測馬鈴薯黑環(huán)斑病毒的研究

馬鈴薯黑環(huán)斑病毒(Potato black ringspot virus,PBRSV)是馬鈴薯重要病毒病害之一.本研究根據(jù)PBRSV基因組中RNA依賴的RNA聚合酶(RDRP)保守序列,設計合成了兩對巢式PCR引物和1條TaqMAN熒光探針,建立了巢式-多重RT-Realtime PCR檢測PBRSV的新方法.該方法采用E.Z.N.ATM珊試劑盒快速提取植物總RNA,并有機地結合了巢式PCR、多重PCR和探針檢測技術.實驗結果表明,該方法檢測靈敏度可達450fg/μL植物總RNA.利用4對引物和1條TaqMAN探針對PCR陽性產(chǎn)物進行確認,本方法檢測的準確性、靈敏度比巢式PCR、單重Realtime PCR等方法高.

作 者： 粟智平 耿金培 魯閩 張京萱 王穎 Su Zhiping Geng Jinpei Lu Ming Zhang Jingxuan Wan Ying   作者單位： 煙臺出入境檢驗檢疫局,山東煙臺,264000  刊 名： 檢驗檢疫學刊  英文刊名： INSPECTION AND QUARANTINE SCIENCE  年，卷(期)： 2009 19(2)  分類號： Q503 S435.32  關鍵詞： 馬鈴薯黑環(huán)斑病毒(PBRSV)   巢式-多重RT-RealtimePCR   檢測  

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