鯽魚酸性磷酸酶酶學(xué)特性及不同效應(yīng)物對(duì)酶活力的影響

經(jīng)NaAc-HAc緩沖液(pH5.0)抽提,正丁醇處理,硫酸銨分級(jí)沉淀,DEAE-32離子交換層析,SephadexG-150凝膠過(guò)濾純化,從鯽魚內(nèi)臟中分離純化出電泳純的酸性磷酸酶.該酶提純倍數(shù)為30.82,比活力195.06U/mg.研究表明,該酶催化對(duì)硝基苯磷酸二鈉水解反應(yīng),最適pH 4.8,pH小于4和大于7時(shí)不穩(wěn)定;最適溫度45℃,溫度高于50℃不穩(wěn)定;米氏常數(shù)為0.23 mmol/L,利用SDS-PAGE測(cè)定酶亞基分子量為33.3 kD.化學(xué)修飾劑SUAN、PMSF、DTT、NBS對(duì)該酶活力影響不大,BrAc和IAe有明顯抑制作用.金屬離子對(duì)該酶催化活力有不同影響,Na~+、K~+、Ni~(2+)、Co~(2+)影響不顯著,Mg~(2+)、Ca~(2+)、Ba~(2+)、Mn~(2+)有激活作用,Ag~+、Cu~(2+)、pb~(2+)、Cd~(2+)有抑制作用,其中Mg~(2+)、Ca~(2+)、pb~(2+)、Cd~2對(duì)鯽魚酸性磷酸酶熒光光譜的影響表明金屬離子對(duì)酶活力的影響與酶構(gòu)象改變有關(guān).

作 者： 高舉 趙欣平 詹付鳳 張營(yíng) 余同 GAO Ju ZHAO Xin-Ping ZHAN Fu-Feng ZHANG Ying YU Tong   作者單位： 四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,生物資源與生態(tài)環(huán)境教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,成都,610065  刊 名： 水生生物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2010 34(2)  分類號(hào)： Q556  關(guān)鍵詞： 酸性磷酸酶   純化   酶學(xué)性質(zhì)   化學(xué)修飾   金屬離子   鯽魚   Acid phosphatase   Purification   Properties   Chemical modification   Metal ions   Carassias auratus  

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