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喙尾琵甲DNA提取方法比較與AFLP反應(yīng)體系的建立
采用CTAB法、改進SDS-蛋白酶K法、SDS-飽和氯化鈉法和提取試劑盒對喙尾琵甲的肌肉、蟲卵和幼蟲進行DNA提取,比較了DNA的提取和保存質(zhì)量,并對AFLP試驗的酶切時間、預(yù)擴增產(chǎn)物稀釋倍數(shù)和選擇性擴增引物量等關(guān)鍵因子進行試驗和優(yōu)化.結(jié)果表明:4種方法對肌肉組織提取的DNA質(zhì)量都較好;3種傳統(tǒng)方法提取的DNA的保存時間長于試劑盒提取的DNA;使用EcoR Ⅰ/Mse Ⅰ內(nèi)切酶組合,10 U EcoR Ⅰ和2 U Mse Ⅰ分兩步各酶切2 h,T4連接酶3 h連接后,以20倍稀釋的預(yù)擴增產(chǎn)物和5 ng/35 ng的E+3/M+3引物量進行選擇性擴增,建立了喙尾琵甲AFLP分子標記體系.
作 者： 趙敏 馮穎 和銳 陳曉鳴 冀煥紅 ZHAO Min FENG Ying HE Rui CHEN Xiao-ming JI Huan-hong 作者單位： 中國林業(yè)科學(xué)研究院資源昆蟲研究所,國家林業(yè)局資源昆蟲培育與利用重點實驗室,云南,昆明,650224 刊 名： 林業(yè)科學(xué)研究 ISTIC PKU 英文刊名： FOREST RESEARCH 年，卷(期)： 2010 23(2) 分類號： Q963 關(guān)鍵詞： 喙尾琵甲 基因組DNA DNA提取 AFLP Blaps rhynchopetera genomic DNA DNA extraction AFLP【喙尾琵甲DNA提取方法比較與AFLP反應(yīng)體系的建立】相關(guān)文章：
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