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體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為軟骨細(xì)胞的研究
目的:探討胰島素樣生長(zhǎng)因子-I(IGF-I)和軟骨細(xì)胞培養(yǎng)液體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)向軟骨細(xì)胞分化的可能性.方法:采用Percoll分離液分離培養(yǎng)人胚M(jìn)SCs,體外擴(kuò)增,用流式細(xì)胞儀測(cè)定MSCs的CD44、CD71、CD34、CD45表達(dá);在第4代MSCs中加入的條件培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo),根據(jù)條件培養(yǎng)基的不同分為4組:①IGF-I組:培養(yǎng)基中加入100ng/mLIGF-I;②軟骨細(xì)胞培養(yǎng)液組:加入軟骨細(xì)胞培養(yǎng)液;③聯(lián)合誘導(dǎo)組:培養(yǎng)液中加入100 ng/mL IGF-I和軟骨細(xì)胞培養(yǎng)液;④對(duì)照組:培養(yǎng)基中不加入IGF-I和軟骨細(xì)胞培養(yǎng)液.采用倒置顯微鏡觀察、Ⅱ型膠原免疫組化、細(xì)胞內(nèi)蛋白多糖(PG)含量測(cè)定等方法判斷誘導(dǎo)細(xì)胞的形態(tài)變化和表達(dá)軟骨基質(zhì)的能力.結(jié)果:體外培養(yǎng)的MSCs呈現(xiàn)成纖維細(xì)胞樣形態(tài),流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,MSCs陽(yáng)性表達(dá)CD44,陰性表達(dá)CD34,CD45;IGF-I和軟骨細(xì)胞培養(yǎng)液聯(lián)合誘導(dǎo)15d后,MSCs開(kāi)始呈現(xiàn)軟骨細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn),Ⅱ型膠原免疫組化呈陽(yáng)性,而未誘導(dǎo)的MSCs組呈陰性;聯(lián)合誘導(dǎo)組細(xì)胞內(nèi)PG含量為8.92μg/ml,顯著高于IGF-I組、軟骨細(xì)胞培養(yǎng)液組和對(duì)照組,但低于正常軟骨細(xì)胞(P＜0.01).結(jié)論:IGF-I和軟骨細(xì)胞培養(yǎng)液能誘導(dǎo)MSCs向軟骨細(xì)胞分化.
李建華(廣州醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室,廣州,510182)
刊 名： 中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ANATOMY 年，卷(期)： 2006 24(6) 分類號(hào)： Q343 關(guān)鍵詞： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 胰島素樣生長(zhǎng)因子 軟骨細(xì)胞【體外誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為軟骨細(xì)胞的研究】相關(guān)文章：
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