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體外誘導人骨髓間充質(zhì)干細胞分化為軟骨細胞的研究

時間:2023-05-03 00:56:45 生物醫(yī)學論文 我要投稿
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體外誘導人骨髓間充質(zhì)干細胞分化為軟骨細胞的研究

目的:探討胰島素樣生長因子-I(IGF-I)和軟骨細胞培養(yǎng)液體外誘導骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)向軟骨細胞分化的可能性.方法:采用Percoll分離液分離培養(yǎng)人胚MSCs,體外擴增,用流式細胞儀測定MSCs的CD44、CD71、CD34、CD45表達;在第4代MSCs中加入的條件培養(yǎng)基進行誘導,根據(jù)條件培養(yǎng)基的不同分為4組:①IGF-I組:培養(yǎng)基中加入100ng/mLIGF-I;②軟骨細胞培養(yǎng)液組:加入軟骨細胞培養(yǎng)液;③聯(lián)合誘導組:培養(yǎng)液中加入100 ng/mL IGF-I和軟骨細胞培養(yǎng)液;④對照組:培養(yǎng)基中不加入IGF-I和軟骨細胞培養(yǎng)液.采用倒置顯微鏡觀察、Ⅱ型膠原免疫組化、細胞內(nèi)蛋白多糖(PG)含量測定等方法判斷誘導細胞的形態(tài)變化和表達軟骨基質(zhì)的能力.結(jié)果:體外培養(yǎng)的MSCs呈現(xiàn)成纖維細胞樣形態(tài),流式細胞儀檢測結(jié)果顯示,MSCs陽性表達CD44,陰性表達CD34,CD45;IGF-I和軟骨細胞培養(yǎng)液聯(lián)合誘導15d后,MSCs開始呈現(xiàn)軟骨細胞的形態(tài)特點,Ⅱ型膠原免疫組化呈陽性,而未誘導的MSCs組呈陰性;聯(lián)合誘導組細胞內(nèi)PG含量為8.92μg/ml,顯著高于IGF-I組、軟骨細胞培養(yǎng)液組和對照組,但低于正常軟骨細胞(P<0.01).結(jié)論:IGF-I和軟骨細胞培養(yǎng)液能誘導MSCs向軟骨細胞分化.

體外誘導人骨髓間充質(zhì)干細胞分化為軟骨細胞的研究

作 者: 黃建榮 李建華 李衛(wèi)平 沈慧勇 王志勇 宋衛(wèi)東 劉尚禮 韓運   作者單位: 黃建榮,李衛(wèi)平,沈慧勇,王志勇,宋衛(wèi)東,劉尚禮,韓運(中山大學第二附屬醫(yī)院骨科,廣州,510120)

李建華(廣州醫(yī)學院生理學教研室,廣州,510182) 

刊 名: 中國臨床解剖學雜志  ISTIC PKU 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ANATOMY  年,卷(期): 2006 24(6)  分類號: Q343  關(guān)鍵詞: 骨髓間充質(zhì)干細胞   胰島素樣生長因子   軟骨細胞  

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