藻膽蛋白ApcE缺失突變體的自催化重組研究

采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增出Anabaena.sp PCC7120別藻藍(lán)蛋白ApcE(1-240)的一系列缺失突變體基因: apcE(14-240)、apcE(25-240)、apcE(63-240)、apcE(85-240)、apcE(121-240)、apcE(133-240)、apcE(187-240),在大腸桿菌中高效表達(dá)分別獲得相對(duì)應(yīng)的缺失突變體蛋白.對(duì)上述脫輔基蛋白與藻藍(lán)膽素(PCB)的體外自催化重組進(jìn)行了研究.結(jié)果表明:在含有4 mol/L尿素的磷酸鉀緩沖體系中,ApcE(25-240)脫輔基蛋白可與藻藍(lán)膽素體外重組實(shí)現(xiàn)共價(jià)連接,獲得的色素蛋白質(zhì)具有最大吸收峰(λmax＝656 nm)和熒光發(fā)射峰(λmax＝670 nm),其余6個(gè)缺失突變體蛋白僅能與藻藍(lán)膽素非共價(jià)連接,不能發(fā)生自催化重組.該結(jié)果為進(jìn)一步研究連接多肽ApcE的結(jié)構(gòu)和功能提供了信息,具有重要意義.

作 者： 刁紅麗 甘春暉 周明 趙開弘 DIAO Hong-li GAN Chun-hui ZHOU Ming ZHAO Kai-hong   作者單位： 刁紅麗,DIAO Hong-li(華中科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,武漢,430074;武漢理工大學(xué)資源與環(huán)境工程學(xué)院,武漢,430070)

甘春暉,周明,GAN Chun-hui,ZHOU Ming(華中科技大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院,武漢,430074)

趙開弘,ZHAO Kai-hong(華中科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,武漢,430074;華中科技大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院,武漢,430074) 

刊 名： 武漢理工大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY OF TECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 28(10)  分類號(hào)： Q754  關(guān)鍵詞： 藻膽體   藻藍(lán)膽素   ApcE   缺失突變體   體外重組   自催化連接  

【藻膽蛋白ApcE缺失突變體的自催化重組研究】相關(guān)文章：

螺旋藻藻膽蛋白研究與應(yīng)用04-26

藻膽蛋白及其在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用04-26

藻藍(lán)蛋白裂合酶CpeS色氨酸定點(diǎn)誘變及體內(nèi)重組功能研究04-26

Cd2+脅迫對(duì)螺旋藻生長(zhǎng)、光譜特性及藻膽蛋白質(zhì)量濃度的影響04-25

溶藻弧菌鐵載體合成及外膜蛋白表達(dá)的研究04-26

重組人PCNA突變體的克隆與穩(wěn)定表達(dá)04-26

太陽(yáng)能-TiO2光催化氧化殺藻實(shí)驗(yàn)研究04-26

糞腸球菌Ace重組蛋白的表達(dá)、純化及黏附活性研究04-27

重組別藻藍(lán)蛋白(rAPC)的純化與鑒定04-26

滅藻劑研究之JS滅藻劑04-26