楓香ISSR-PCR擴增條件的優(yōu)化

對浙江省天臺山楓香自然種群的DNA進行提取和ISSR-PCR擴增條件的優(yōu)化.分析了Mg2+濃度、4×dNTP濃度、BSA濃度、模板DNA用量、引物用量、Taq DNA聚合酶用量等對反應(yīng)結(jié)果的影響.建立了適用于楓香ISSR分析最適宜的反應(yīng)體系:10 μl PCR反應(yīng)體積中,1 × Taq酶配套緩沖液(10 mmol·L-1 Tris-HCl,pH值9.0,50 mmol·L-1 KCl,0.1%TritonX-100),2.0 mmol·L-1 Mg2+,0.15 mmol·L-1 4×dNTP,2 mg·mL-1 BSA,10 ng模板DNA,6 pmol引物,0.9 U Taq DNA聚合酶,引物UBC808的最適退火溫度為52.4℃.用此反應(yīng)體系對天臺山楓香自然種群進行了遺傳多樣性分析,結(jié)果顯示其多態(tài)位點百分率為84.26%,Nei指數(shù)為0.2665,Shannon信息指數(shù)為0.4044,其遺傳多樣性處于較高水平.

作 者： 畢泉鑫 金則新 曾志成 葉文國 李建輝 BI Quan-xin JIN Ze-xin ZENG Zhi-cheng YE Wen-guo LI Jian-hui   作者單位： 畢泉鑫,金則新,曾志成,李建輝,BI Quan-xin,JIN Ze-xin,ZENG Zhi-cheng,LI Jian-hui(臺州學(xué)院生態(tài)研究所,浙江,臨海,317000)

葉文國,YE Wen-guo(天臺縣林業(yè)局,浙江,天臺,317200) 

刊 名： 福建林業(yè)科技  PKU 英文刊名： JOURNAL OF FUJIAN FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 35(1)  分類號： Q943  關(guān)鍵詞： 楓香   ISSR   優(yōu)化   遺傳多樣性  

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