一種新的高立體選擇性羰基還原酶的性質(zhì)及分離

從近平滑假絲酵母(Candida parapsilosis CCTCC 203011)中分離得到了新的NADPH依賴型羰基還原酶.粗酶經(jīng)硫銨分級沉淀、DEAE Sepharose離子交換層析、Phenyl-sepharose FF疏水層析、Blue Sepharose FF親和層析后在SDS-PAGE上顯示為單一條帶,其酶蛋白的相對分子質(zhì)量為30 Kd.該酶還原反應的最適Ph值為4.5,最適溫度為35 ℃,Cu2+對羰基還原酶有強烈的抑制作用.該酶具有較高的底物專一性和立體選擇性,對α-羥基苯乙酮和4-氯乙酰乙酸乙酯具有較高的不對稱還原活力,其產(chǎn)物分別為(S)-苯基乙二醇和(R)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯,e.e值分別為100%和94.3%.因此該酶蛋白是不對稱合成手性醇有效的生物催化劑之一.經(jīng)LC-MASS-MASS分析得到了酶蛋白中一個肽段的氨基酸序列,通過比對發(fā)現(xiàn)該酶與假定蛋白(hypothetical protein CaO19.10414)具有一定的同源性.

作 者： 羊明 徐巖 穆曉清 肖榮 YANG Ming XU Yan MU Xiaoqing XIAO Rong   作者單位： 江南大學教育部工業(yè)生物技術(shù)重點實驗室,江蘇,無錫,214036  刊 名： 化工進展  ISTIC PKU 英文刊名： CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS  年，卷(期)： 2006 25(9)  分類號： Q814.1  關(guān)鍵詞： 生物催化   羰基還原酶   分離純化   (S)-苯基乙二醇   (R)-4-氯-3-羥基丁酸乙酯  

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