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結(jié)合通用引物快速簡(jiǎn)便鑒定陽(yáng)性克隆的PCR方法論文摘要
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摘要:通用引物與載體多克隆住點(diǎn)兩端序列互補(bǔ),將目的片段構(gòu)建入栽體pGEM-T Easy中,利用載體通用引物M13F和M13R結(jié)合片段特異引物進(jìn)行菌液PCR反應(yīng).用PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果來(lái)篩選陽(yáng)性克隆并鑒定目的片段插入方向,同時(shí)能有效對(duì)短插入片段重組子進(jìn)行篩選與鑒定.最終以DNA測(cè)序結(jié)果來(lái)驗(yàn)證,與測(cè)序結(jié)果一致,顯示通用引物PCR方法對(duì)陽(yáng)性克隆的篩選和鑒定優(yōu)于傳統(tǒng)酶切和普通PCR鑒定方法,能夠彌補(bǔ)傳統(tǒng)方法的不足,且簡(jiǎn)便快速,可作為篩選和鑒定陽(yáng)性克隆的有效手段.
作 者: 崔靜 黃愛(ài)龍 張文露 Cui Jing Hung Ailong Zhang Wenlu
作者單位: 重慶醫(yī)科大學(xué)病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶,400016
刊 名: 生物技術(shù)通報(bào) PKU
英文刊名: BIOTECHNOLOGY BULLETIN
年,卷(期): 2008""(3)
分類號(hào): Q78
關(guān)鍵詞: 通用引物PCR 鑒定 插入方向 短插入片段
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