HBV前S2蛋白單克隆抗體的制備和生物學(xué)特性的鑒定

目的克隆表達(dá)HBV前S2蛋白,用純化的重組蛋白GST-S2免疫BALB/C小鼠,通過(guò)雜交瘤技術(shù)制備抗HBV前S2蛋白的單克隆抗體(mAb),并鑒定其特性.方法利用含雙拷貝乙肝病毒adw2亞型基因全序列的質(zhì)粒pEcob6,經(jīng)PCR方法擴(kuò)增出HBV前S2片段,在GST表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物用谷胱甘肽親和層析純化后,用于免疫BALB/c小鼠,采用雜交瘤技術(shù)制備抗前S2蛋白的mAb,采用間接ELISA方法和Western blot進(jìn)行mAb特異性鑒定;同時(shí)采用間接ELISA方法鑒定mAb相對(duì)親和力.結(jié)果獲得一株可分泌特異性mAb的雜交瘤細(xì)胞7A6;相對(duì)親和力均在107以上.Western blot顯示該株mAb能特異識(shí)別重組前S2蛋白.結(jié)論成功地制備出抗HBV前S2蛋白的一株mAb.

作 者： 賴梅梅 王雪梅 張君 蔡雪飛 鄭健 黃愛(ài)龍 Lai Meimei Wang Xuemei Zhang Jun Cai Xuefei Zheng Jian Huang Ailong   作者單位： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶,400016  刊 名： 生物技術(shù)通報(bào)  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2008 ""(3)  分類號(hào)： Q5  關(guān)鍵詞： 乙肝病毒   前S2蛋白   單克隆抗體   生物學(xué)特性  

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