GST-talin1融合蛋白的原核表達及純化

應(yīng)用PCR方法擴增talin1的cDNA,并將其重組入谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶融合基因表達載體pGEX-4T-1中,獲取人源的GST-talin1融合蛋白,為下階段深入的研究talin1的結(jié)構(gòu)、功能、及其與之相互作用的蛋白打下基礎(chǔ).經(jīng)酶切、序列鑒定,選擇正確重組子,將其質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導(dǎo)表達,用Glutathione Sepharose 4B柱純化,western blot鑒定.克隆得到了一個2400bp的talin1的cDNA片斷,重組質(zhì)粒目的DNA測序正確,純化出分子量約為121.6kD的融合蛋白.用基因工程方法使GST-talin1重組質(zhì)粒在原核細胞表達并成功純化出GST-talin1融合蛋白.

作 者： 吳爽 耿建國 WU Shuang GENG Jian-guo   作者單位： 吳爽,WU Shuang(廣東藥學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院組織胚胎教研室,廣州,510006;中科院生化細胞研究所分子細胞生物學(xué)實驗室,上海,200031)

耿建國,GENG Jian-guo(中科院生化細胞研究所分子細胞生物學(xué)實驗室,上海,200031) 

刊 名： 生物學(xué)雜志  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF BIOLOGY  年，卷(期)： 2008 25(3)  分類號： Q51  關(guān)鍵詞： talin   P-選凝素   GST-融合蛋白   親和層析  

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