萘脅迫下水稻幼苗抑制差減雜交cDNA文庫構建

從200mg/Kg萘脅迫水稻幼苗根系中成功分離和純化了高純度的總RNA和mRNA,并以無萘處理為Driver,以200mg/Kg的幼苗為Tester,通過cDNA雙鏈的合成及兩次PCR擴增,富集到兩組處理中差異表達的大小在200～800bp的cDNA序列,pGEMT的連接和藍白斑篩選表明雜交文庫滴度和重組率分別達到1.5×106 pfu/mL和96%,共收集陽性克隆8000個,形成了抑制消減雜交的質粒cDNA文庫.隨機挑取酶切質粒的電泳分析表明,載體中均有插入片段.高效抑制消減雜交文庫的建立為進一步分析基因的差異表達及分離萘脅迫下抗性基因奠定了基礎.

作 者： 趙胡 ZHAO Hu   作者單位： 阜陽師范學院生物系,安徽,阜陽,236041;中國農業(yè)科學院生物技術研究所,北京,100081  刊 名： 生物學雜志  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF BIOLOGY  年，卷(期)： 2008 25(3)  分類號： Q291  關鍵詞： 萘   水稻   抑制差減抑制雜交   cDNA文庫  

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