溶藻弧菌asp基因在大腸桿菌中表達(dá)活性研究及條件優(yōu)化

為進(jìn)一步研究溶藻弧菌堿性絲氨酸蛋白酶(ASP)蛋白生物學(xué)活性和功能,將構(gòu)建的pET23d-asp在大腸桿菌BL21(DE3)中表達(dá),對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行純化分析,并優(yōu)化表達(dá)條件.結(jié)果表明:在咪唑洗脫緩沖液濃度為100 mmol/L時(shí),表達(dá)的可溶性ASP被大量洗脫,純化的ASP相對(duì)分子質(zhì)量約為42 000,具有蛋白活性;在誘導(dǎo)溫度28℃、異丙基-β-D硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)濃度1 mmol/L及誘導(dǎo)時(shí)間16 h時(shí),表達(dá)的活性ASP蛋白最多.

作 者： 蔡雙虎 魯義善 吳灶和 簡(jiǎn)紀(jì)常 湯菊芬 黃郁蔥 CAI Shuang-hu LU Yi-shan WU Zao-he JIAN Ji-chang TANG Ju-fen HUANG Yu-cong   作者單位： 廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院,廣東省水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物病原生物學(xué)及流行病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室暨廣東省水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物病害控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東,湛江,24025  刊 名： 廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào)  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF GUANGDONG OCEAN UNIVERSITY  年，卷(期)： 2008 28(3)  分類號(hào)： Q933+S917.1  關(guān)鍵詞： 溶藻弧菌   asp基因   基因構(gòu)建   基因表達(dá)   表達(dá)條件   大腸桿菌  

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