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杜氏鹽藻硝酸鹽還原酶基因5′上游序列的克隆與功能分析
目的: 克隆杜氏鹽藻硝酸鹽還原酶(NR)基因5′上游序列,并對(duì)其功能進(jìn)行分析.方法: 利用BamHI、EcoRI、HindⅢ、PstⅠ、SalⅠ、Xbal 6種限制性內(nèi)切酶分別酶切鹽藻基因組DNA,并與接頭連接,構(gòu)建成鹽藻基因組步行文庫(kù).采用LA-PCR方法,從上述鹽藻步行基因組文庫(kù)中擴(kuò)增NR基因5′上游序列,測(cè)序并進(jìn)行分析.為檢測(cè)其表達(dá)特性,構(gòu)建了該片段與GUS嵌合基因的表達(dá)載體pNR-GUS,通過(guò)電擊法將所構(gòu)建的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化鹽藻,組織化學(xué)染色法觀察GUS的表達(dá).結(jié)果: 從鹽藻基因組步行文庫(kù)中擴(kuò)增出約1200bp特異片段,序列分析表明5′上游序列含有啟動(dòng)子的特征性序列.GUS瞬時(shí)表達(dá)染色結(jié)果顯示,該DNA片段具有硝酸鹽誘導(dǎo)和銨抑制的啟動(dòng)子活性.結(jié)論: 所克隆的鹽藻的5′上游序列可能是一種具有"開(kāi)關(guān)"活性的可控性啟動(dòng)子.
作 者： 李杰 賈巖龍 閆紅霞 潘衛(wèi)東 薛樂(lè)勛 LI Jie JIA Yan-long YAN Hong-xia PAN Wei-dong XUE Le-xun 作者單位： 鄭州大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究室,鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院,鄭州,450052 刊 名： 中國(guó)生物工程雜志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 26(11) 分類(lèi)號(hào)： Q94 關(guān)鍵詞： 杜氏鹽藻 硝酸鹽還原酶基因 5′上游序列 功能【杜氏鹽藻硝酸鹽還原酶基因5′上游序列的克隆與功能分析】相關(guān)文章：
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