抗菌肽Dermaseptin S4及其突變體基因在大腸桿菌中的表達

目的 構(gòu)建表達抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突變體K4-S4的工程菌,并表達目的 蛋白.方法 采用重疊延伸PCR法設(shè)計和擴增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定向克隆入載體pUC-18中,經(jīng)酶切、測序鑒定,重組至表達載體pGEX-4T-1中,構(gòu)建抗菌肽DS4及K4-S4基因表達載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)plyS,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達,12%SDS-PAGE鑒定.結(jié)果 構(gòu)建的抗菌肽DS4及K4-S4基因工程菌所表達的目的 蛋白,經(jīng)SDS-PAGE鑒定可見相對分子質(zhì)量34 000的特異性目的 條帶,37℃誘導(dǎo)5 h的蛋白表達量最高,且多數(shù)以包涵體形式存在.結(jié)論 已成功構(gòu)建抗菌肽DS4及K4-S4工程菌,并表達目的 蛋白,為進一步研究其功能和應(yīng)用奠定了基礎(chǔ).

作 者： 張慶華 韓躍武 謝俊秋 盧天龍 任惠子 馮惟萍   作者單位： 蘭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究所,蘭州,730000  刊 名： 中國生物制品學(xué)雜志  ISTIC 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS  年，卷(期)： 2008 21(4)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 抗菌肽   Dermaseptin S4   突變體   大腸桿菌   表達  

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